孔板梯度稀釋儀流程:灌注稀釋液--加樣--原位混勻--取換槍頭--繼續(xù)稀釋,整個過程“一鍵搞定”,無需人員手工操作,開口容器上部的移動機(jī)構(gòu)體積減少減小,并且易于消毒,運(yùn)動機(jī)構(gòu)移動速度柔和,對潔凈氣流的干擾降低。機(jī)型小巧,體積小巧,方便安裝于層流超凈工作臺或局部百級凈化區(qū),也可自帶FFU百級凈化單元,還可增加傳動與收集模塊。
孔板梯度稀釋儀方法/步驟:
1、通常,在96孔板的每個孔中加入100微升細(xì)胞懸浮液。從底部附近的井的左側(cè)添加細(xì)胞懸浮液。加入一半平板后,混合細(xì)胞懸液,不要再加入,繼續(xù)加入剩余的一半平板。添加完所有板后,蓋上板,用左手輕輕握住板的左側(cè),用右手輕輕輕敲板的右邊緣,注意抓力(我通常輕敲三次)。如果它太強(qiáng)或太多次,細(xì)胞就會被濃縮和堆積。順時(shí)針旋轉(zhuǎn)盤子(逆時(shí)針效果不好),依次敲擊剩余的三面,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱中。
2、加入細(xì)胞懸液后,抬起細(xì)胞培養(yǎng)板,從底部向上觀察光線,看細(xì)胞是否聚集。然后從底部敲擊以分散它。
3、如果實(shí)驗(yàn)室有平板振蕩器,建議用這個儀器輕微振蕩。效果好,即振幅小、頻率高。
4、細(xì)胞應(yīng)該盡可能分散,大多數(shù)細(xì)胞處于單一狀態(tài)。離心后,*懸浮!有轉(zhuǎn)移到六孔板上的,就是震動!搖晃時(shí),不要讓細(xì)胞液轉(zhuǎn)向,否則細(xì)胞會全部被帶到中間而不均勻!
5、當(dāng)一瓶細(xì)胞裝滿后,進(jìn)行正常處理。將它均勻地吹進(jìn)培養(yǎng)瓶中,然后鋪上6孔板,每孔2ml。涂抹后,不用觀察直接用酒精棉擦拭,然后放入培養(yǎng)箱中。稍微向左三圈,向右三圈,先三圈,然后三圈。基本上,24小時(shí)后,每個孔中的細(xì)胞將非常均勻。